在《火影忍者：忍者新世代》中，火之国木叶隐村中有许多家族，其中有六道仙人长子因陀罗的后裔族群——“宇智波一族”。今天的主角“宇智波佐助”便是其中的天才忍者之一。
佐助与鸣人、小樱一同度过了忍者学校的时光，毕业后他们被分配到卡卡西所带领的第七班。
佐助总是给人一种高不可攀的感觉，仿佛是一座冰山，让人难以接近。在自我介绍时，佐助坦言自己讨厌的东西很多，几乎没有什么喜欢的东西。然而，在他冷漠的外表下，有着对家族复兴的坚定信念和对那个男人的深深仇恨。
佐助一开始对队友都显得漠不关心，对鸣人的挑衅置若罔闻，对樱的善意举动也显得冷淡。当第七班三人在卡卡西的铃铛测试中陷入困境时，佐助展现出了宇智波一族的招牌忍术——火遁·豪火球之术。
在中忍考试期间，佐助为了变得更强，接受了卡卡西的特训。他通过写轮眼复制了小李的动作，提升了自己的体术能力，还学会了原创忍术——千鸟。这一招如同一道闪电划破夜空，令人惊叹不已。
在正式比赛中，佐助的高速移动让我爱罗陷入苦战。他趁此机会首次使用千鸟，成功地破解了我爱罗的绝对防御，并打伤了我爱罗。
学会了千鸟的佐助并未满足于此。为了追求更强的力量，他决定离开木叶，启程跟随大蛇丸修行。在佐助离开前，小樱发现了他的计划，她极力劝说佐助留下，并对他表白。然而，此时的佐助内心充满了仇恨，身为复仇者的他没有办法留在小樱身边。他只是温柔地说了声“谢谢”，然后打晕了小樱，离开了村子。
在路途中，佐助遇到了前来阻止他的鸣人。两人在终末之谷展开了激战。
最后战斗以佐助的胜利而告终，但他并未杀死鸣人。佐助决定用自己的方式获得力量，不想像鼬所希望的那样，为了开启万花筒写轮眼而杀害同伴。
在两年的时间里，佐助的实力得到了极大的提升。他使用草薙剑作为武器，并对雷遁忍术进行了各种新开发。他的刀法练得炉火纯青，同时还能将雷属性的查克拉注入到武器中，以提升自身的攻击能力。他的瞳力也变得深不可测，仿佛能洞察一切。
过了一段时间后，鼬在完成一系列的布置和安排后，佐助在鼬的指示下，两人约定在宇智波一族的故地进行决战。兄弟二人的战斗异常激烈，最后佐助使用了自创的S级忍术“麒麟”，想直接击杀鼬。
然而在千钧一发之际，鼬展现了前所未有的力量，开启了“须佐能乎”，以绝对的实力击溃了佐助。
但此时的鼬身患重病，加上用尽了全部的力气，最后倒在了佐助的面前。这场兄弟对决的结果以佐助的胜利宣告结束，佐助的复仇也终于完成了。
佐助通过神秘面具男得知了宇智波一族与木叶曾经的恩怨以及鼬的真实身份与灭族真相。得知真相后，佐助开始慢慢回忆起鼬的过往。愤怒与悲伤使得他开启了万花筒写轮眼。此时佐助又有了新的目标——向木叶复仇。
为了实现这个目标，佐助需要借助晓的力量。他带领的鹰小队和晓达成了暂时的合作关系。作为条件之一是鹰小队需要捕捉八尾人柱力“奇拉比”。
来到云隐村与奇拉比交手后，由于实力差距悬殊。全员都不敌奇拉比，陷入了苦战之中。最后关头依靠佐助的天照结束了这场恶战。
“鹰小队”在经过一番休整后，决定向木叶发起进攻。途中却被神秘面具男告知木叶已被摧毁。接着佐助将目标变为潜入五影大会，准备刺杀代理火影的志村团藏。
佐助闯入五影会谈想要刺杀代理火影的志村团藏，可惜被团藏逃脱了。但佐助紧追不舍，在神秘面具男的帮助下追到了团藏。
佐助质问团藏关于鼬的真相，在团藏说出真相后，称鼬为木叶叛徒后，佐助的怒火彻底爆发，两人开始对决。期间佐助不断使用天照、须佐能乎等招数攻击团藏，最后成功将团藏击倒。
在《火影忍者：忍者新世代》中，各种形态的佐助已经为我们带来过非常多的精彩表现了。但关于佐助的故事仍然在续写着，他是一个爱与恨的交织体，有爱才有恨。然而恨之中，又包含着浓重的爱意以及憧憬。
希望佐助在7月23日这一天，能够开心地过着属于你独一无二的日子，宇智波佐助，生日快乐!
拥有天才与帅气之名
才貌双全，外冷内热
敏感而不善于表达
具备超强能力和智力的战斗天才
背负着宇智波之名
却是宇智波一族的最后的幸存者
迈向永无止境的黑暗
成为了孤独的复仇者
用双眼把黑暗看得一清二楚
